为确保2013年春节期间旅游饭店客房价格的基本稳定，全省各级价格主管部门认真贯彻落实省政府关于元旦、春节期间客房价格调控的部署。从备案的情况看，旅游饭店客房价格总体水平比2012年春节备案价格下降10%，其中三亚市下降幅度达到15.7%。三亚市核准备案的旅游饭店标准间客房销售价格在2000元/间·天以下的占43.6%，2000-3000元(不含3000元)的占11.2%，3000-4000元(不含4000元)的占12.5%，4000-5000元(不含5000元)的占23.6%。保亭七仙岭区域客房价格总体在2000-3000元/间·天，淳风生物科技,西北酵母单杂交文库构建，华夏玻璃网,西安淳风生物科技有限公司，其余市县备案价格基本都在1000元/间·天以下(除别墅、套房)，大多数不超过500元/间·天。 　　世界银行发布的《非洲旅游：经济增长和改善民生》的报告称，撒哈拉以南非洲国家的旅游业将为经济增长带来新的动力，到2021年，该区域旅游业从业人员将达到670万人。根据该份报告，黑非洲地区的工作岗位中，有二十分之一直接和间接与旅游相关，在48个黑非洲国家中，有33个有能力通过发展工业、吸引私人资本来使旅游业获得成功。一些非洲国家如佛得角、肯尼亚、毛里求斯、纳米比亚、卢旺达、南非和坦桑尼亚等，通过采取简化旅游政策、旅游经营多元化等措施，为旅游业的发展创造了良好的环境。 　　峨眉山门票从150元直接升到185元，香港迪士尼乐园最高提价幅度超过17%……刚刚过去的清明节假期，“涨价”成为各地景区的流行词汇。但是，在这股涨价风潮中，唯独北京的各个景区门票无一涨价。北京市旅游委发布的数据显示，清明假期我市共接待包含北京游客在内的国内旅游者253万人次，与去年基本持平;旅游总收入则达到11.4亿元，同比增长15.4%。在景区门票价格不变、旅游人数持平的背景下，旅游消费为何依然大幅增长?记者昨日调查发现，北京旅游业附加值的不断升高，是旅游消费增长的主因。 真核生物基因的转录起始需转录因子参与，转录因子通常由DNA结合结构域(DNA—binding domain，BD)和转录激活结构域(activation domain，AD)。用于酵母单杂交系统的酵母GAL4蛋白是一种典型的转录因子，GAL4的DNA结合结构域靠近羧基端，含有几个锌指结构，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位点(UAS)，而转录激活结构域可与RNA聚合酶或转录因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在这一过程中，DNA结合结构域和转录激活结构域可完全独立地发挥作用。在GAL4系统中构建与基因的ORFs融合的激活结构域GAL4-AD的特异载体，顺式作用元件与GAL4的DNA结合结构域GAL4-BD融合构建载体，分别转化酵母细胞。在酵母内表达的蛋白若与顺式作用元件发生相互作用时，就会将GAL4-BD和GAL4-AD结合在一起，从而与上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)结合，激活相应报告基因的表达，在相应的营养缺陷型培养基上筛选阳性。 基因转录实际上是转录调控因子和启动子区各种顺式作用元件相互作用的结果，这种结合犹如蛋白质与蛋白质的互作一样具有特异性，这是研究顺式作用元件即DNA序列与蛋白质互作的基础。 我公司总经理毕业于华中农业大学生化与分子生物学专业，博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选（Clontech体系，针对胞浆蛋白和核蛋白）的工作，在校期间为实验室构建了3个高效的水稻酵母双杂交文库（组织分别为水稻叶片，幼穗，种子），具有丰富的实践经验。本公司在RNA抽提，mRNA纯化，酵母转化等步骤中对于试剂选择有着独到的见解，用性价比最高的试剂为客户节约成本。同时公司对于反转录，酵母转化，酵母菌落PCR等步骤进行优化，使得初始基因丰度更高，最大程度保证互作基因/蛋白不致遗漏；转化效率更高，提高弱互作因子筛到的可能性；均一化更高，降低重复筛到概率；空载体更少，高效并且节约成本。 通过RNA提取，mRNA分离，cDNA合成，cDNA长度分级，分级后的cDNA与酵母单杂交载体(pGADT7-Rec2）进行infusion重组，重组后产物转化感受态细胞，文库铺板检测与菌液保存获得插入片段＞500bp（插入片段不是越长越好，较长的片段可能会漏筛部分较小片段的互作基因），重组率＞90%，库容≥1 x 108 transformants，滴度≥2 x 107cfu/ml的酵母单杂交文库。 客户提供新鲜组织或细胞，25个工作日交付酵母单杂交文库构建报告（电子版），酵母单杂交文库构建图片（电子版），转化到酵母细胞的单杂交文库甘油菌100ml。可用于酵母单杂交，酵母双杂交，酵母三杂交文库的筛选。 真核生物基因的转录起始需转录因子参与，转录因子通常由DNA结合结构域(DNA—binding domain，BD)和转录激活结构域(activation domain，AD)。用于酵母单杂交系统的酵母GAL4蛋白是一种典型的转录因子，GAL4的DNA结合结构域靠近羧基端，含有几个锌指结构，可激活酵母半乳糖苷酶的上游激活位点(UAS)，而转录激活结构域可与RNA聚合酶或转录因子TFIID相互作用，提高RNA聚合酶的活性。在这一过程中，DNA结合结构域和转录激活结构域可完全独立地发挥作用。在GAL4系统中构建与基因的ORFs融合的激活结构域GAL4-AD的特异载体，顺式作用元件与GAL4的DNA结合结构域GAL4-BD融合构建载体，分别转化酵母细胞。在酵母内表达的蛋白若与顺式作用元件发生相互作用时，就会将GAL4-BD和GAL4-AD结合在一起，从而与上游激活序列(upstream activating sequence, UAS)结合，激活相应报告基因的表达，在相应的营养缺陷型培养基上筛选阳性。 基因转录实际上是转录调控因子和启动子区各种顺式作用元件相互作用的结果，这种结合犹如蛋白质与蛋白质的互作一样具有特异性，这是研究顺式作用元件即DNA序列与蛋白质互作的基础。 我公司总经理毕业于华中农业大学生化与分子生物学专业，博士期间长期从事酵母单/双杂交文库构建及筛选（Clontech体系，针对胞浆蛋白和核蛋白）的工作，在校期间为实验室构建了3个高效的水稻酵母双杂交文库（组织分别为水稻叶片，幼穗，种子），具有丰富的实践经验。本公司在RNA抽提，mRNA纯化，酵母转化等步骤中对于试剂选择有着独到的见解，用性价比最高的试剂为客户节约成本。同时公司对于反转录，酵母转化，酵母菌落PCR等步骤进行优化，使得初始基因丰度更高，最大程度保证互作基因/蛋白不致遗漏；转化效率更高，提高弱互作因子筛到的可能性；均一化更高，降低重复筛到概率；空载体更少，高效并且节约成本。 通过RNA提取，mRNA分离，cDNA合成，cDNA长度分级，分级后的cDNA与酵母单杂交载体(pGADT7-Rec2）进行infusion重组，重组后产物转化感受态细胞，文库铺板检测与菌液保存获得插入片段＞500bp（插入片段不是越长越好，较长的片段可能会漏筛部分较小片段的互作基因），重组率＞90%，库容≥1 x 108 transformants，滴度≥2 x 107cfu/ml的酵母单杂交文库。 客户提供新鲜组织或细胞，25个工作日交付酵母单杂交文库构建报告（电子版），酵母单杂交文库构建图片（电子版），转化到酵母细胞的单杂交文库甘油菌100ml。可用于酵母单杂交，酵母双杂交，酵母三杂交文库的筛选。

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