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更新日期:2021-08-09
一般说,离心机转速在30000r/min以上的称为超速离心.离心技术,特别是超速离心技术是分子生物学、生物化学研究和工业生产中不可缺少的手段!1924年T!Svedberg和Rinde研制出世界上第yi台涡轮超速离心机以来,发展非常迅速,已广泛地应用到科学研究和生产的各个领域!离心机转头zui高转速已达150000r/min(贝克曼OptimaMAX-XP,2010年数据),zui大离心力达1019000Xg(贝克曼OptimaMAX-XP,2010年数据)!
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但对密度不同、大小类似的物质则不易分离。蔗糖梯度是一种常用的介质.用不同浓度的蔗糖溶液(5%-60%)配成梯度,用于梯度离心.再分别进行收集处于不同区带里的各个组份。沉降平衡离心这是静力学的方法!在离心管中形成一个液体梯度,在离心时各组份以不同的速度下沉,但最终停留在与自己相同的密度中,形成一条狭窄的平衡带,并保持相对的稳定.为了使样品所有组份都能达到它们的平衡位置,需要长时间离心!这种方法适用于分离大小相似但密度不同的物质,如核酸的分离!
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但回收率和纯度是有矛盾的,要提高回收率,势必提高转速或延长离心时间,这样大小相近的颗粒也会沉到管底。因此该法多用于粗提纯或初步浓缩样品!速度区带(或速度梯度)离心本法是将样品放在一个连续的密度梯度液体上,通过离心,大颗粒沉降快,小颗粒沉降慢!经过一段时间,相同的颗粒就在同一深度形成一条带子,因此把各种组份分开来!它适用于分离密度相同、而大小不同的物质,如不同的蛋白质组份密度都差不多,但分子量不一样,用本法很容易将其分开。
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氯化铯梯度是常用于平衡离心的介质,分辨率很高,可区别密度相差0。05的组分,但离心时间需十几到几十小时,且价格很贵!已有一种商品名叫"Percoll"的聚蔗糖溶液可以代替氯化铯梯度.该介质能迅速形成梯度,使离心时间大大缩短到1-2h而仍有很好的分离效果.并且有配套的标记珠(Densitymarkerbeads)可以测定样品的密度.超速离心机离心机是借离心力分离液相非均一体系的设备。根据物质的沉降系数、质量、密度等的不同,应用强大的离心力使物质分离、浓缩和提纯的方法称为离心。
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